一株Ⅰ型犬腺病毒的分离与鉴定

• 作者: 何丽芳 唐青海 易程 杨海 滕威 王芳宇 谢璇 邓莉 阳坤
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 犬腺病毒 分离鉴定 PCR 免疫过氧化物酶单层细胞染色法
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 82-87
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.02.021

摘要

为给Ⅰ型犬腺病毒(CAV-Ⅰ)后续研究提供基础材料,采集疑似犬传染性肝炎患犬粪便,用PCR方法进行CAV-Ⅰ核酸检测,并运用犬肾传代细胞(MDCK)进行病毒分离培养,采用PCR和免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测病毒在细胞内的繁殖状态.结果显示:患犬粪便样品PCR检测为CAV-Ⅰ核酸阳性,病料接种MDCK细胞培养24h后出现明显的“葡萄串样”细胞病变效应(CPE);培养物血清学鉴定为CAV抗原阳性,不同代次病毒培养物均为CAV-Ⅰ核酸强阳性;第9代病毒核酸序列与GenBank中CAV-Ⅰ毒株核苷酸相似性在99.0％以上,与CAV-Ⅱ相似性仅为65.3％;该病毒与CAV-Ⅰ毒株处于同一遗传分支1;病毒接种MDCK后8h内均无抗原检出,12h后细胞核中分布大量的CAV抗原,24h后细胞出现典型的“葡萄串样”病变,抗原在细胞中呈弥散分布.上述结果表明,分离到的毒株为CAV-Ⅰ,命名为CAV-ZY 180711.