Slit2对高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化的作用及机制

• 作者: 侯世会 刘军辉 官涛 李艺 王小龙 胡成芳 黄云剑
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Slit2 ROBO1 上皮间质转分化 高糖 HK-2细胞
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 652-658
• 页数: 7页
• 分类号: R692.6
• 字数: 5842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2019.08.05

摘要

目的 探讨Slit2/ROBO1信号通路在高糖诱导肾小管上皮细胞上皮间质细胞转分化(EMT)中的作用及机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,进行高糖浓度梯度实验,随机分为正常组、对照组1、对照组2和高糖组1、高糖组2;同时进行高糖时间梯度实验,随机分为正常组、对照组、高糖24 h组、高糖36 h组和高糖48 h组,采用Western blotting检测HK-2细胞中Slit2、ROBO1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白的表达变化,筛选出最佳高糖刺激浓度和时间.采用Slit2过表达质粒及阴性对照质粒转染HK-2细胞,验证转染成功后,随机分为正常组、对照组、高糖组、高糖+空载组及高糖+Slit2组,经最佳高糖浓度及时间刺激后提取总蛋白,Western blotting检测纤维连接蛋白及α-SMA的表达变化.结果 在高糖浓度梯度实验中,与正常组相比,高糖组1、高糖组2的Slit2表达明显下降(分别为0.647±0.048、0.210±0.023 vs.1.000±0.050),ROBO1表达明显下降(分别为0.703±0.041、0.303±0.022 vs.1.000±0.057),纤维连接蛋白表达明显增加(分别为1.953±0.042、2.997±0.078 vs.0.990±0.059),α-SMA表达明显增加(分别为1.767±0.012、2.427±0.059 vs.1.033±0.067),差异均有统计学意义(P<0.05).与高糖组1相比,高糖组2的Slit2、ROBO1表达下降,纤维连接蛋白和α-SMA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).在高糖时间梯度实验中,与正常组相比,高糖36 h组、高糖48 h组的Slit2表达明显下降(分别为0.557±0.020、0.450±0.055 vs.0.943±0.032),ROBO1表达下降(分别为0.600±0.023、0.227±0.028 vs.1.000±0.058),高糖24 h组、高糖36 h组、高糖48 h组纤维连接蛋白表达增加(分别为1.247±0.052、1.733±0.084、2.780±0.090 vs.0.970±0.040),α-SMA表达增加(分别为1.277±0.041、1.767±0.120、2.537±0.078 vs.1.033±0.067),差异均有统计学意义(P<0.05).与高糖24 h组相比,高糖36 h组、高糖48 h组的Slit2表达下降(分别为0.557±0.020、0.450±0.055 vs.0.893±0.034),ROBO1表达下降(分别为0.600±0.023、0.227±0.028 vs.0.930±0.025),纤维连接蛋白及α-SMA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与高糖36 h组相比,高糖48 h组的Slit2和ROBO1表达下降,纤维连接蛋白和α-SMA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).在高糖环境下,Slit2过表达及阴性对照质粒转染成功后,观察Slit2过表达对肾小管EMT的影响发现,与正常组相比,高糖组、高糖+空载组、高糖+Slit2组的纤维连接蛋白表达增加(分别为2.760±0.012、2.667±0.027、1.460±0.034 vs.1.000±0.058),α-SMA表达水平增加(分别为2.487±0.048、2.557±0.037、1.270±0.017 vs.1.000±0.050),差异有统计学意义(P<0.05).与高糖+空载组相比,高糖+Slit2组的纤维连接蛋白和α-SMA表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Slit2和ROBO1的表达下降参与了高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT过程,过表达Slit2可显著抑制高糖诱导的EMT.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡成芳	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
2	李艺	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
3	刘军辉	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
4	王小龙	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
5	侯世会	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
6	官涛	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
7	黄云剑	重庆陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0