PKCι对CIK杀伤胰腺癌细胞的影响及作用机制探讨

• 作者: 冷小红 张红梅 朱彤波 李宗显 杨金河 王佩佩 王怡人
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: CIK细胞 胰腺癌 PKCι TGF-β
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 821-826
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的 研究非典型蛋白激酶C异构体ι (protein kinase C,PKCι)对细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)作用于胰腺癌细胞的杀伤作用的影响,并探讨其作用机制.方法 用白介素-2(IL-2)、干扰素(IFN)、分化抗原簇三分子单克隆抗体(CD3 mAb)等细胞因子诱导健康人外周血中单个核细胞,制备成CIK细胞.将胰腺癌细胞MiaPaCa、PANC-1和胰腺上皮细胞HPDE6-C7分为对照组、化学抑制剂硫代苹果酸钠(ATM组)、与CIK共培养组、ATM+-CIK共培养组.采用细胞计数检测各组细胞1～8 d的生长情况;各组细胞培养48 h后采用流式仪检测细胞死亡率;使用针对人PKCι的小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)敲低胰腺癌细胞中PKCι的表达,胰腺细胞转染过表达PKCι的重组质粒,分别采用免疫印迹检测PKCι蛋白表达和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PKCι对下游信号分子中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)基因表达的影响;并在MiaPaCa和PANC-1与CIK共培养中加入不同质量浓度TGF-β(1、10、20 ng/mL),48 h后流式仪检测细胞死亡情况,以探讨PKCι影响CIK细胞杀伤活性的相关机制.结果 ATM和CIK可抑制胰腺癌细胞MiaPaCa、PANC-1的生长,诱导癌细胞凋亡和死亡,ATM可增强CIK对癌细胞的杀伤作用.敲低胰腺癌细胞中PKCι的表达,可下调其下游信号分子TGF-β基因的表达,而胰腺细胞过表达PKCι,可上调TGF-β mRNA表达,并且在胰腺癌细胞中加入TGF-β 10、20 ng/mL,癌细胞的死亡率较对照组下降(P＜0.05).结论 降低胰腺癌细胞中PKCι的表达可以抑制胰腺癌细胞的生长,增强CIK对癌细胞的杀伤作用.PKCι的作用机制可能是通过调控TGF-β水平影响肿瘤细胞的免疫逃逸.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张红梅	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	6	3	1.0	1.0
2	王怡人	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
3	杨金河	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
4	冷小红	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
5	王佩佩	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	2	0	0.0	0.0
6	李宗显	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
7	朱彤波	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	2	0	0.0	0.0