810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞的影响

• 作者: 孙嘉锴 宋基伟 张家玮 李鲲 梁卓文 王哲 胡学昱 郑峤
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 弱激光治疗 M1型巨噬细胞 星形胶质细胞 硫酸软骨素蛋白多糖
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 156-163
• 页数: 8页
• 分类号: R683.2|Q813.1
• 字数: 5953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2019.02.10

摘要

目的:探讨810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞活化及硫酸软骨素蛋白多糖(Chondmitin sulfate proteoglycans,CSPG)分泌的影响.方法:构建脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)动物模型,设立脊髓损伤(SCI)组和脊髓损伤后弱激光治疗(low level laser therapy,LLLT)组,免疫荧光检测脊髓损伤区星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和CSPG的表达情况;建立体外巨噬细胞-星形胶质细胞共培养模型,分为Ctrl组(空白对照),M1组(采用M1型巨噬细胞条件培养基培养星形胶质细胞);M1+LLLT组(采用M1条件培养基培养星形胶质细胞,同时进行弱激光照射),采用Western Blot检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和星形胶质细胞活化经典通路信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)的表达,细胞计数试剂盒(celcounting kit-8,CCK-8)法检测星形胶质细胞的活性,实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测CSPG的核心蛋白聚集蛋白聚糖(aggrecan)和多功能蛋白聚糖(versican)的表达情况.结果:体内实验发现,LLLT组小鼠脊髓损伤区GFAP和CSPG表达较SCI组均减少(P＜0.05).体外实验结果显示,LLLT后巨噬细胞iNOS的表达显著降低(P＜0.05).与Ctrl组相比,M1组星形胶质细胞的活性明显升高(P＜0.05),磷酸化信号转导与转录激活因子3(phosphorylated-signal transduction and activators of transcription 3,pSTAT3)的表达显著增加(P＜0.05).而相较于M1组,M1+LLLT组星形胶质细胞活性显著下降(P＜0.05),pSTAT3/STAT3的表达明显抑制(P＜0.05).RT-qPCR及ELISA结果显示,M1组星形胶质细胞aggrecan、versican的mRNA和蛋白的表达比Ctrl组均显著增强(P＜0.05);M1+LLLT组相较于M1组,aggrecan的mRNA和蛋白的表达受到抑制(P＜0.05),versican的蛋白表达虽有下降,但无统计学差异.结论:LLLT可抑制小鼠脊髓损伤区星形胶质细胞的活化,减少CSPG的表达,且这种作用可通过弱激光作用下的巨噬细胞实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张家玮	空军军医大学西京医院骨科	4	1	1.0	1.0
2	孙嘉锴	空军军医大学西京医院骨科	4	1	1.0	1.0
3	郑峤	空军军医大学西京医院骨科	3	1	1.0	1.0
4	宋基伟	空军军医大学西京医院骨科	3	1	1.0	1.0
5	李鲲	空军军医大学西京医院骨科	3	1	1.0	1.0
6	梁卓文	空军军医大学西京医院骨科	6	1	1.0	1.0
7	王哲	空军军医大学西京医院骨科	21	27	3.0	4.0
8	胡学昱	空军军医大学西京医院骨科	8	9	2.0	2.0