沉默PRR14基因抑制结肠癌HCT116细胞增殖

• 作者: 刘鑫 李方方
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 富脯氨酸蛋白14 HCT116细胞 细胞增殖 细胞周期
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1268-1274
• 页数: 7页
• 分类号: R735.3+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.11.12

摘要

已有报道显示,富脯氨酸蛋白14(proline-rich protein 14,PRR14)促进肿瘤的发生发展,但具体作用机制仍不清楚.本文以结肠癌细胞为模型,探索其对细胞增殖和细胞周期进程的影响.qPCR和Western印迹检测发现,PRR14在4个结肠癌细胞系中呈现高水平表达.合成特异靶向PRR14基因的siRNA,转染结肠癌HCT116细胞.检测发现,PRR 14基因表达下调约70％.CCK8结果显示,沉默PRR14后各时间点细胞增殖能力均显著降低,克隆形成实验细胞克隆数减少约40％;流式细胞仪结果显示,沉默PRR14后,G1期细胞比例升高约10％,S期细胞比例降低约14％;BrdU标记免疫荧光检测结果显示,BrdU阳性细胞比例减少约50％,表明细胞DNA合成速率显著降低.机制分析表明:促G1/S期转换基因周期蛋白依赖性激酶2 (cyclin dependent kinase 2,CDK2)mRNA水平降低约85％,对应的蛋白质水平也明显降低,G1/S期转换抑制因子周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A (cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A/P21)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B(cyclin dependent kinase inhibitor 1B,CDKN1 B/P27) mRNA水平分别升高约1.8倍和5倍,对应的蛋白质水平也明显升高.沉默PRR14表达,G1/S期相关基因表达紊乱,导致细胞G1期阻滞并抑制细胞增殖.结肠癌细胞中PRR14高表达可促进癌细胞恶性增殖.