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绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger基因的克隆表达及序列分析
绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger基因的克隆表达及序列分析
作者:
吴国华
吴金恩
周雪雁
杨静
郑亚东
郭小腊
陈晓倩
陈轶霞
颜鲁军
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
绵羊痘病毒
RING finger蛋白
序列分析
原核表达
摘要:
[目的]对绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger蛋白的基因进行克隆,表达以及序列分析,初步探究绵羊痘病毒RING finger蛋白是否具有E3泛素连接酶活性,为阐明其在绵羊痘病毒感染过程中对泛素蛋白酶体系统的调控作用奠定基础.[方法]以绵羊痘病毒甘肃古浪株DNA为模板,通过PCR扩增RING finger基因.利用Pfam数据库、DNAstar等软件进行序列及遗传进化分析;将RING finger基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-SPPVRFP重组表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,并进行SDS-PAGA和Western-blot分析.[结果]绵羊痘病毒RING finger基因由723个核苷酸组成,编码的240个氨基酸的分子量约为28.5 ku,具有RING finger结构域.不同羊痘病毒株间RING finger基因核苷酸序列同源性高达99.2%,氨基酸序列同源性高达98.3%.不同的RING finger蛋白都含有8个保守的半胱氨酸和组氨酸.SDS-PAGA分析显示,重组SPPVRFP大小约为55 ku,Westem-blot分析显示,重组SPPVRFP不能与绵羊痘病毒阳性血清反应.[结论]成功克隆、表达并纯化了绵羊痘病毒RING finger基因,对SPPV GS-GL株RING-finger蛋白进行序列分析,推测其可能具有E3泛素连接酶活性.
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文献信息
篇名
绵羊痘病毒甘肃古浪株RING finger基因的克隆表达及序列分析
来源期刊
甘肃农业大学学报
学科
农学
关键词
绵羊痘病毒
RING finger蛋白
序列分析
原核表达
年,卷(期)
2019,(3)
所属期刊栏目
动物科学·动物医学
研究方向
页码范围
1-8
页数
8页
分类号
S852.65+4
字数
4297字
语种
中文
DOI
10.13432/j.cnki.jgsau.2019.03.001
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节点文献
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RING finger蛋白
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原核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
甘肃农业大学学报
主办单位:
甘肃农业大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1003-4315
CN:
62-1055/S
开本:
大16开
出版地:
甘肃省兰州市安宁区营门村1号甘肃农业大学
邮发代号:
54-79
创刊时间:
1959
语种:
chi
出版文献量(篇)
3553
总下载数(次)
2
总被引数(次)
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