印楝素对猪睾丸ST细胞的生长和基因表达的影响

• 作者: 代新兰 冉雪琴 卢圣菲 李升 牛熙 王嘉福 马鑫芮 黄世会
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 印楝素 猪睾丸ST细胞 细胞凋亡 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 677-683
• 页数: 7页
• 分类号: S828.8
• 字数: 4124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.04.011

摘要

印楝素(azadirachtin)是从印楝(Azadirachta indica)种子提取的植物杀虫剂,广泛应用于农田害虫防治.为了明确印楝素是否影响公猪的繁殖力,本研究采用猪(Susscrofa)睾丸ST细胞(swine testis cells),通过MTT(3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)方法和流式细胞术,研究印楝素对猪睾丸细胞生长的影响,以实时荧光定量PCR方法检测印楝素对繁殖相关基因的影响.随着印楝素处理浓度的增加,ST细胞变圆脱落聚集;MTT实验证明印楝素以剂量依赖方式抑制ST细胞的生长,表现出细胞毒作用,24 h的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为7.646 mg/L;流式细胞术检测到印楝素诱导ST细胞凋亡,8mg/L印楝素引起的早期凋亡率明显高于5 mg/L处理组(P＜0.05);基质金属蛋白酶15 (matrix metallopeptidase 15,MMP15)、蛋白激酶Cα相互作用蛋白(protein interacting with Cα kinase,PICK1)、骨形态发生蛋白6(bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因的表达量随印楝素处理浓度的增加而下降;突变同源蛋白4 (MutS homolog 4,MSH4)基因的表达量随印楝素处理的浓度而增加.综上所述,印楝素可抑制猪睾丸细胞的生长,诱导细胞凋亡,并影响繁殖相关基因的表达,提示印楝素可影响公猪的繁殖力.本研究为饲料中印楝素残留控制提供了理论依据.