摘要:
目的 研究在人不同瘢痕组织及增生性瘢痕不同生长时期成纤维细胞中甲基化结合蛋白2(methyl CpG binding protein 2,MECP2)和组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)的表达及意义.方法 收集2016年8月至2017年5月重庆医科大学附属第一医院烧伤整形科收治的118例瘢痕患者及33例上睑松弛患者的手术标本,包括正常皮肤33例(男12例,女性21例,年龄34~68岁);正常瘢痕32例(男19例,女13例,年龄8~68岁);瘢痕疙瘩35例(男11例,女24例,年龄11~62岁);增生性瘢痕51例(男22例,女29例,12~58岁).其中增生性瘢痕根据生长时间分为4组:0~3个月组10例、4~6个月组11例、7~12个月组13例、>12个月组17例.采用免疫组织化学及蛋白质印迹法检测各组组织中MECP2及HDAC6的表达情况,实时定量聚合酶链反应技术检测各组组织中MECP2 mRNA和HDAC6 mRNA的表达,并比较各组之间的差异.实验所得数据用SPSS 20.0进行统计学分析,各组之间的差异采用单因素方差分析进行检验,2组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 免疫组织化学结果显示,MECP2在正常皮肤成纤维细胞中表达呈阴性或弱阳性,在正常瘢痕中表达呈弱阳性,在增生性瘢痕中表达呈阳性,在瘢痕疙瘩成纤维细胞核内大量表达.MECP2蛋白在正常皮肤(1326.4±572.3)、正常瘢痕(2341.4±816.2)、增生性瘢痕(3500.7±1407.6)、瘢痕疙瘩(4787.9±1514.3)中的表达逐渐增加(F=33.820,P=0.001);同样MECP2 mRNA在正常皮肤(0.82±0.43)、正常瘢痕(1.14±0.45)、增生性瘢痕(1.59±0.39)、瘢痕疙瘩(2.14±0.53)中的表达也是逐渐增加(F=23.400,P=0.001).在正常皮肤(1332.5±746.7)、正常瘢痕(2307.7±1027.4)、增生性瘢痕(4107.4±1223.1)、瘢痕疙瘩(5155.9±1265.3)中HDAC6蛋白的表达差异有统计学意义(F=50.270,P=0.001);HDAC6 mRNA在正常皮肤(0.57±0.23)、正常瘢痕(1.03±0.35)、增生性瘢痕(1.47±0.31)、瘢痕疙瘩(1.87±0.45)中的表达差异有统计学意义(F=38.060,P=0.001).而在增生性瘢痕中0~3个月组(4758.4±660.1)和4~6个月组(4602.4±583.9)MECP2表达差异无统计学意义(t=1.280,P=0.970),7~12个月组(3000.7±982.7)和>12个月组(1990.7±992.3)MECP2表达量明显降低(F=25.800,P=0.001);HDAC6在0~3个月组(5069.3±1236.1)和4~6个月组(5316.7±1237.4)HDAC6中表达差异无统计学意义(t=1.020,P=0.980),在7~12个月组(3084.7±1685.5)和>12个月组(2304.6±1337.1)表达量明显降低(F=11.410,P=0.001).结论 在人体瘢痕形成过程中MECP2和HDAC6对纤维化的形成发挥着至关重要的作用,由MECP2和HDAC6介导的表观遗传学调控是抑制瘢痕形成的一个重要靶点.