启动子DNA甲基化和组蛋白乙酰化对胃癌中PDX1表达的影响

• 作者: 余莲英 刘庆华 廖山婴 徐丽姝 沙卫红 王启仪 王蓓蓓 马娟
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 PDX1 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 175-182
• 页数: 8页
• 分类号: R73
• 字数: 4435字
• 语种: 中文

摘要

[目的]已知胃癌中PDX1表达下调,本研究旨在探讨DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰对PDX1基因表达的调控.[方法]免疫组化法检测胃癌组织芯片中PDX1、Dnmt1和HDAC的表达,分析其相关性.5’-aza-dC和TSA处理胃癌细胞,RT-PCR检测PDX1 mRNA水平,分析DNA去甲基化和组蛋白乙酰化对PDX1表达的影响;构建6个PDX1启动子片段至pGL3载体,检测转录活性,分析去甲基化和乙酰化对PDX1启动子转录活性的影响.MSP和BSP评估PDX1启动子DNA甲基化状态以及启动子活性受5’-aza-dC和SssI的影响;ChIP评估PDX1启动子组蛋白乙酰化状态以及启动子活性受TSA的影响.[结果]免疫组化结果显示与正常组织对比,胃癌组织中的PDX1表达下调,Dnmt1和HDAC表达上调,PDX1和Dnmt1及HDAC的表达负相关(P＜0.05);5’-aza-dC和TSA使PDX1在胃癌细胞中重获表达;F383是PDX1启动子核心,5’-aza-dC和TSA增强F383转录活性,SssI抑制F383转录活性;MSP结果显示F383在胃癌细胞中呈完全甲基化;BSP结果显示与对照比较,位于F383区域内17个CpG位点中80％以上呈现甲基化.ChIP分析结果提示F383呈组蛋白H3和H4低乙酰化.[结论]PDX1基因在胃癌中表达沉默与启动子DNA高甲基化和组蛋白低乙酰化有关.