MAPK4基因敲除对小鼠脾脏免疫细胞组成的影响

• 作者: 冒灵 刘士明 周涯 徐林 胡琳 赵娟娟 郭萌萌 陈超 陈龙庆
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MAPK4 脾脏 免疫细胞
• 年，卷（期）: 2019,（13）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 1548-1552,1558
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 3419字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.13.003

摘要

目的:观察MAPK4基因敲除(KO)对小鼠脾脏免疫细胞组成的影响并探讨其意义.方法:利用基因同源重组对小鼠MAPK4基因进行敲除,PCR法鉴定MAPK4-/-小鼠;Western blot检测小鼠脾脏中MAPK4蛋白表达;计算MAPK4-/-小鼠脾脏的脏器指数和总细胞数;HE染色观察脾脏的病理学变化;流式细胞术(FCM)分析小鼠脾脏中CD19+B细胞和CD3+T细胞的比例并计算细胞绝对数,并检测CD4+T和CD8+T细胞的比例及其活化相关膜分子CD62L和CD69的表达;最后,FCM分析脾脏中固有免疫细胞DC细胞、NK细胞、巨噬细胞和γδT细胞的比例并计算细胞绝对数.结果:与野生型(WT)小鼠相比,MAPK4-/-小鼠的MAPK4蛋白表达水平明显降低(P<0.05);脏器指数无明显改变(P>0.05),脾脏细胞总数明显降低(P<0.05),脾小结增大,结构紊乱(P<0.05);CD19+B细胞和CD3+T细胞的细胞绝对数都明显降低(P<0.001);CD4+T细胞的比例和绝对数均明显减少(P<0.01),同时,CD8+T细胞的绝对数明显减少(P<0.001);固有免疫细胞中DC细胞、NK细胞、巨噬细胞和γδT细胞的细胞绝对数均明显降低(P<0.001).结论:MAPK4敲除明显影响小鼠脾脏中免疫细胞的组成,提示其在机体免疫细胞发育和功能中具有重要作用.