体外扩增的NK细胞运载溶瘤呼肠孤病毒对结直肠癌细胞的杀伤效应

• 作者: 刘金河 廖春香 杨薇 王念雪 赵星 陈晓庆 龙世棋
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 呼肠孤病毒 自然杀伤细胞 运载细胞 结直肠癌细胞
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 492-499
• 页数: 8页
• 分类号: R735.3|R730.51
• 字数: 5696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2019.05.002

摘要

目的:评价体外扩增的人NK细胞能否作为呼肠孤病毒的运载细胞并探讨其临床转化应用价值.方法:体外扩增人NK细胞,用NK细胞装载呼肠孤病毒,激光共聚焦显微镜观察呼肠孤病毒与NK细胞结合的部位.NK细胞运载呼肠孤病毒(Reo-NK)到达肿瘤细胞后,CCK-8法检测在中和抗体的存在下病毒发挥的溶瘤作用;qPCR法检测肿瘤细胞内病毒RNA的相对表达量.CCK-8法检测Reo-NK对结直肠癌KRAS基因突变型(DLD-1)和野生型(CaCo-2、HT29)细胞株的杀伤效应,ELISA双抗体夹心法检测NK细胞释放的穿孔素水平.结果:呼肠孤病毒主要结合于NK细胞膜上,在人AB型血清的存在下体外扩增的NK细胞可将呼肠孤病毒传递到肿瘤细胞,且传递后的呼肠孤病毒仍具有显著溶瘤活性(P＜0.01);同时检测到肿瘤细胞内病毒RNA的表达量显著增高(P＜0.01).与NK组相比,Reo-NK组对KRAS基因突变型和野生型结直肠癌细胞株的细胞毒作用均显著增强(P＜0.05),穿孔素的释放均明显增加(P＜0.05).结论:体外扩增的人NK细胞适合作为呼肠孤病毒的运载细胞,且呼肠孤病毒能够增强NK细胞的细胞毒作用,两者联合后对结直肠癌细胞可发挥更强的杀伤作用,因而具有重要的临床转化应用价值.