摘要:
目的 探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量.以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象,用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞(观察组)和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞(对照组),qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量.Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达.细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 膀胱癌组织中LINC01204表达量(0.773±0.063)明显低于癌旁组织(3.665 ±0.330),差异有统计学意义(t=8.612,P<0.001).膀胱癌细胞株BIU-87(0.320±0.034)、T24 (0.515±0.056)、J82(0.644±0.039)、5637(0.147 ±0.018)中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(1.009±0.077),差异均有统计学意义(=8.160,P<0.001;t=5.179,P=0.002;t=4.221,P=0.006;t=10.890,P<0.001),5637细胞表达量最低.观察组5637细胞中LINC01204表达量(11.000±1.028)明显高于对照组(1.019 ±0.119),差异均有统计学意义(t=9.651,P<0.001).观察组GPC5 mRNA表达量(4.476±0.347)明显高于对照组(1.046 ±0.163),差异均有统计学意义(t=8.962,P<0.001).Western blot结果显示,观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调.与对照组相比,观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天(0.686±0.044 vs 0.536±0.026,t=2.943,P=0.026)开始增殖能力明显降低.观察组5637细胞迁移数[(118.300±16.260)个]明显低于对照组[(208.200±22.930)个],差异均有统计学意义(t=3.198,P=0.019).观察组5637细胞侵袭数[(50.390±5.368)个]明显低于对照组[(97.480±15.350)个],差异均有统计学意义(t=2.896,P=0.028).结论 LINC01204可上调GPC5基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭,针对LINC01204的靶向治疗有望成为膀胱癌新的基因治疗手段.