泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性

• 作者: 刘建云 吴萍 熊建军 谢鑫
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 泛素水解酶22 丝裂原活化蛋白激酶激酶6 启动子 转录
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 122-127
• 页数: 6页
• 字数: 3284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.02.002

摘要

目的:克隆丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6,MKK6)基因启动子,研究泛素水解酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)对MKK6转录活性的调控作用.方法:采用PCR扩增MKK6基因启动子片段,并以该片段为模板对USP22结合位点进行定点突变,将野生型与突变型启动子片段定向插入荧光素酶表达载体pGL3-Basic;用重组载体与内参质粒pRL-TK共转染HeLa细胞,行双荧光素酶活性检测以确定其转录活性;利用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation.CHIP)实验观察USP22蛋白与MKK6启动子是否存在直接的结合;下调USP22表达后,检测MKK6转录活性的变化.结果:成功扩增MKK6启动子及其突变体并构建荧光素酶表达载体;USP22结合位点的突变导致该启动子活性在HeLa细胞中明显降低(P＜0.05);USP22与MKK6启动子在细胞中存在直接结合;抑制USP22的表达导致MKK6转录水平明显下降(P＜0.05).结论:在HeLa细胞中,USP22有效地调控MKK6基因的转录.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊建军		21	28	4.0	4.0
3	谢鑫	九江学院基础医学院药理教研室	5	17	3.0	4.0
4	吴萍		2	7	1.0	2.0
5	刘建云		4	1	1.0	1.0