阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验

• 作者: 孟锦昕 寇美玲 廖德芳 朱建波 李乐 李华春 杨恒 肖雷 苗海生
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 阿卡斑病毒 cELISA 抗体检测
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 371-375
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201807015

摘要

为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA(cELISA)抗体检测方法.通过对60份牛、 羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率(PI)临界值为60％;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、 鹿流行性出血热病毒(EHDV)、 羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1:128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验(SNT)检测结果(1:64);批内和批间变异系数(CV)在0.54％～5.27％和0.3％～9.3％之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国ID VET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76％,可以替代进口同类产品.本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查.