沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质转化和糖酵解

• 作者: 吴海根 许娟秀
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白 微小RNA-135a 上皮-间充质转化 糖酵解 SCAI
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1423-1431
• 页数: 9页
• 分类号: R737.33
• 字数: 5773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.08.012

摘要

目的:探索乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)通过抑制微小RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)调节宫颈癌CaSki细胞上皮-间充质转化(EMT)和糖代谢的作用及其下游分子机制.方法:体外培养宫颈癌CaSki细胞,采用小干扰RNA(si-HBXIP)沉默HBXIP,miR-135a拟似物(miR-135a-mimic)过表达miR-135a,miR-135a-mimic和si-HBXIP共转染细胞;首先用Western blot检测细胞中EMT转录因子Twist1、EMT标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)及肿瘤细胞侵袭抑制因子(SCAI)的水平,其次用试剂盒法检测细胞培养基中葡萄糖摄取量和乳酸分泌量的变化,Western blot检测葡萄糖转运蛋白1(Glut-1)的水平;再次,用RT-qPCR法检测si-HBXIP对miR-135a水平的影响,Western blot检测miR-135a-mimic和miR-135a-inhibitor对HBXIP水平的影响;最后,用Western blot检测miR-135a-mimic对SCAI表达水平的影响,生物信息学预测并使用萤光素酶报告基因实验验证miR-135a和SCAI的关系.结果:单独转染si-HBXIP,可显著抑制EMT转录因子及其标记蛋白的表达,并上调SCAI的水平(P<0.05),显著上调葡萄糖摄取量并下调乳酸分泌(P<0.05)和Glut-1表达水平(P<0.05);与单独转染si-HBXIP组相比,miR-135a-mimic和si-HBXIP共转染组中EMT转录因子的水平上调(P<0.05),SCAI的水平下调(P<0.05),葡萄糖摄取量下降(P<0.05)、乳酸分泌水平和Glut-1表达水平升高(P<0.05);另外,miR-135a被验证是HBXIP的下游分子;Western blot结合萤光素酶报告基因实验发现SCAI是miR-135a的关键靶基因之一.结论:沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质转化和糖酵解.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许娟秀	江西省妇幼保健院肿瘤科	8	14	2.0	3.0
2	吴海根	江西省妇幼保健院肿瘤科	20	67	4.0	7.0