鸡源AID基因的克隆及其抗新城疫病毒作用

• 作者: 丁铲 仇旭升 刁有祥 孙英杰 孟春春 宋翠萍 廖瑛 张耀丹 徐腾飞 李继红 汪伟 谭磊
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 活化诱导胞嘧啶脱氨酶 新城疫病毒 基因编辑酶 抗病毒作用
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 975-981
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.28

摘要

APOBEC家族成员中AID蛋白具有DNA/RNA编辑酶功能,同时具有抑制病毒增殖的作用,但具体机制尚不明了.本研究首先根据NCBI公布的鸡全基因组序列进行生物信息学分析,预测鸡AID的基因序列并通过设计PCR引物,成功在鸡法氏囊cDNA样品中扩增出鸡AID基因(chAID).通过建立并优化chAID的实时定量RT-PCR(rRT-PCR)检测方法,对鸡体内AID基因的表达以及其分布情况进行检测;同时通过Western blot试验对chAID蛋白在鸡细胞中的表达进行检测.试验显示,chAID基因能够在鸡细胞以及组织脏器中正常表达.新城疫病毒(NDV)感染鸡原代成纤维细胞、淋巴细胞后能够引起内源性chAID基因水平的上调;SPF鸡感染NDV后,chAID基因在不同组织脏器中均出现上调现象,以免疫器官最为显著.为了进一步验证chAID基因对NDV增殖的影响,进一步检测在细胞中过表达chAID基因对NDV增殖的影响.研究结果表明:重组chAID蛋白具有抗NDV病毒活性,本研究为进一步研究鸡chAID奠定了基础.