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摘要:
目的:探索乳腺癌患者血清来源的外泌体最佳纯化条件,并对所得的外泌体进行形态鉴定和浓度测定,以期获得较优的分离血清来源外泌体的纯化方法. 方法:收集患者血清,分别用超高速离心法(Ultra-exo)和沉淀试剂盒法(Prekit-exo)分离提取外泌体.生物透射电镜负染上样观察外泌体生物学形态,并用纳米激光粒度跟踪测量仪(NTA)检测其粒径大小和粒径分布,用western blot来进行蛋白表征鉴定.结果:两种方法得到的外泌体,生物透射电镜下可见超高速离心获得的是具有典型半杯托状结构的外泌体,大小在 30~200nm 之间,而沉淀试剂盒法分离的产物不具有典型的外泌体形态,甚至有很多杂蛋白,且背景十分杂乱.此外,NTA显示超高速离心法得到的外泌体粒径分布均匀,在一个较窄的粒径范围(117.8±28.7nm).而沉淀试剂盒法所得产物在粒径分布上呈现多段粒径区间,分布范围宽(289.5±103.3nm).Western Blot结果显示,沉淀试剂盒法提取的外泌体杂蛋白多余超高速离心法. 结论:本实验结果表明,分离血清来源的外泌体,超高速离心法显然优于沉淀试剂盒法.
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文献信息
篇名 两种乳腺癌患者血清来源的外泌体分离方法的比较
来源期刊 湖南师范大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 外泌体 分离 超高速离心 沉淀试剂盒法
年,卷(期) 2019,(2) 所属期刊栏目 临床医学
研究方向 页码范围 82-86
页数 5页 分类号 R3411
字数 3410字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 曹晓丽 湖南郴州市第一人民医院中心医院检验中心 1 0 0.0 0.0
2 钱晓庆 上海交通大学生物医学工程学院上海交通大学纳米生物医学工程研究所 4 6 1.0 2.0
3 唐容 湖南郴州市第一人民医院中心医院检验中心 1 0 0.0 0.0
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湖南师范大学学报(医学版)
双月刊
1673-016X
43-1449/R
大16开
湖南省长沙市岳麓区咸嘉湖,《湖南师范大学学报(医学版)》编辑部
2004
chi
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