miR-152靶向AT1R对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

• 作者: 张明星 徐超 曹艺敏 王晓景 管倩倩 陈小亮
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: miR-152 AT1R AngⅡ 心肌纤维化 胶原合成
• 年，卷（期）: 2019,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3055-3061
• 页数: 7页
• 分类号: R-33|R541.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.16.010

摘要

目的:探讨微小RNA-152(miR-152)靶向血管紧张素受体(AT1R)对血管紧张素Ⅱ (Ang Ⅱ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.方法:采用1 μmol/L Ang Ⅱ刺激体外培养的大鼠心肌成纤维细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,蛋白免疫印迹(Western blot)检测成纤维细胞中胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅢ)以及AT1R蛋白表达的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测成纤维细胞中miR-152和AT1R mRNA的表达.在Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞中分别转染miR-152mimic和mimic control、AT1R siRNA和siRNA control以及共转染miR-152mimic和AT1R过表达载体,以同样的方法检测细胞增殖和胶原合成情况.双荧光素酶报告基因实验检测miR-152和AT1R靶向结合关系.结果:AngⅡ刺激能够促进心肌成纤维细胞增殖,上调成纤维细胞中胶原蛋白Collagen Ⅰ和CollagenⅢ的表达,同时能够抑制miR-152的表达,促进AT1RmRNA和蛋白的表达.在Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞中,过表达miR-152或沉默AT1R均能够上调细胞增殖活力,促进胶原合成.双荧光素酶报告基因实验检测结果显示AT1R是miR-152靶基因,miR-152能够负向调控AT1R的表达.在Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞中,同时过表达miR-152和AT1R能够逆转单独过表达miR-152导致的细胞增殖抑制作用,回调胶原蛋白Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ合成抑制作用.结论:miR-152能够抑制Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成,其作用机制可能是通过靶向AT1R的表达实现的.