参附益心颗粒对缺氧诱导的大鼠H9C2心肌细胞能量代谢的影响

• 作者: 崔琳 朱明军 李彬 王小晓 王幼平 王新陆 王贺 谢世阳 郝轩轩 高原
• 来源期刊: 中医杂志
• 关键词: 慢性心力衰竭 参附益心颗粒 H9C2心肌细胞 线粒体损伤 能量代谢
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 862-868
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13288/j.11-2166/r.2019.10.013

摘要

目的 探讨参附益心颗粒治疗慢性心力衰竭的可能作用机制. 方法 以不同浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.9、1.2 mg/ml)的参附益心颗粒处理H9C2细胞24h,MTT法检测细胞活性,筛选后续实验的药物浓度.将H9 C2细胞分为正常组(正常培养)、模型组(缺氧6h)、曲美他嗪组(1×10-4 mol/L曲美他嗪+缺氧6h)、辅酶Q10组(1×10-4 mol/L辅酶Q1O+缺氧6h)及中药低剂量组(0.25 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h)、中药高剂量组(0.5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h),检测各组心肌细胞ATP含量、底物代谢酶脂肪酸转运酶(FAT)、肉碱脂酰转移酶1(MCPT-1)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、葡萄糖转运子4(GLUT-4)、腺苷酸转运体(ANT)、肌酸激酶(CK)蛋白表达水平;观察各组H9C2心肌细胞超微结构的变化.将H9C2细胞分为正常组、模型组、中药组(0.5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h),JC-1染色检测线粒体膜电位变化. 结果 0.5 mg/ml参附益心组及低于此浓度组无细胞毒性,以0.5 mg/ml参附益心颗粒用于中药组.与正常组比较,模型组H9C2细胞ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量明显降低,AMPK、PDH蛋白含量明显升高(P＜0.05).与模型组比较,中药组和辅酶Q1O组心肌细胞中ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT4、ANT、CK蛋白含量均明显升高(P＜0.05).正常组细胞线粒体结构正常,模型组细胞膜破裂,线粒体肿胀,边界模糊不清.与模型组对比,中药组细胞损伤明显减轻,细胞膜完整,线粒体结构清晰.JC-1染色显示中药组可以改善线粒体膜电位的下降.结论 参附益心颗粒可能通过升高心肌H9C2细胞ATP、GLUT-4、ANT、FAT、MCPT-1、MCAD、CK蛋白表达,降低AMPK、PDH蛋白表达,改善缺氧诱导H9C2心肌细胞线粒体膜电位,从而发挥治疗慢性心力衰竭的作用.