lncRNA-GAS5调节Notch通路对肺癌A549细胞血管生成拟态的影响

• 作者: 张志华 樊頔 汤建华 牛玉春 马峰
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 A549细胞 血管生成拟态 Notch通路 lncRNA-GAS5
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1412-1417
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13315/j.cnki.cjcep.2019.12.006

摘要

目的 探讨lncRNA-生长停滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript5,GAS5)通过调节Notch通路对肺癌A549细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响.方法 培养人肺癌细胞A549和人正常肺细胞MRC-5,采用qRT-PCR技术检测细胞中lncRNA-GAS5的表达水平,向肺癌细胞A549转染GAS5过表达质粒(p-EGFP-C1-GAS5组)和空载体质粒p-EGFP-C1(阴性对照组),空白对照组未处理,荧光显微镜观察转染效率,收集转染后对数期细胞进行三维体外培养法,观察VM,Western blot法检测HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、MMP-2、MMP-9及Notch通路蛋白Notch1、DLL4的表达水平.结果 qRT-PCR结果显示,与正常细胞MRC-5比较,肺癌细胞A549 lncRNA-GAS5 mRNA水平显著降低(P<0.05);荧光显微镜下观察质粒转染24 h后细胞转染效率达80％;细胞转染后,与空白对照组比较,p-EGFP-C1-GAS5组lncRNA-GAS5表达水平显著升高(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无显著性.肺癌A549细胞接种后10 h细胞贴附在Matrigel基质胶上彼此连接成空腔样、环状结构,形成拟态血管,转染过表达质粒的A549细胞组管腔形成数明显多于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无显著性;Western blot检测显示,p-EGFP-C1-GAS5组VEGF、VE-cadherin、HIF-1α、MMP-2、MMP-9表达水平与阴性对照组和空白对照组相比,均显著降低(P<0.05),阴性对照组和空白对照组各蛋白表达量无显著变化;p-EGFP-C1-GAS5组血管生成相关蛋白Notch1、DLL4表达水平与阴性对照组和空白对照组相比,均显著降低(P<0.05),阴性对照组和空白对照组各蛋白表达量无显著变化.结论 lncRNA-GAS5过表达抑制VM的形成和血管生成相关蛋白的表达,其可能通过抑制Notch通路的激活,抑制VM的形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤建华	河北北方学院附属第一医院药学部	41	222	9.0	13.0
2	张志华	河北北方学院附属第一医院呼吸内科	49	133	6.0	8.0
3	马峰	河北北方学院附属第一医院肿瘤内科	14	38	4.0	5.0
4	牛玉春	河北北方学院附属第一医院肿瘤内科	2	6	1.0	2.0
5	樊頔		1	0	0.0	0.0