降钙素相关基因肽在小鼠巨噬细胞炎症调控中的作用研究

• 作者: 刘乾坤 林樟萍 肖美芳 陆喆
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 降钙素相关基因肽 活性氧簇-核苷酸结合低聚体结构域样受体3 小鼠 巨噬细胞 炎症因子
• 年，卷（期）: 2019,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究·论著
• 页码范围: 18-24
• 页数: 7页
• 分类号: R-332
• 字数: 4846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2019.13.004

摘要

目的 探讨降钙素相关基因肽(CGRP)在炎症调控中的作用,验证CGRP可通过活性氧簇-核苷酸结合低聚体结构域样受体3(ROS-NLRP3)信号通路抑制小鼠巨噬细胞炎症因子的分泌.方法 实验分为对照组、脂多糖(LPS)100 ng/ml组(LPS组)、CGRP 10 ng/ml组(CGRP 10组)、CGPR 30 ng/ml组(CGRP 30组)、CGRP 100 ng/ml组(CGRP 100组)及CGRP 30 ng/ml+LPS 100 ng/ml组(CGRP 30+LPS组).作用12 h后,分别收集各组细胞的培养上清,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达.同时收集各组细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测炎症因子IL-1β、TNF-α 和炎症复合体NLRP3 mRNA的表达水平.流式细胞术检测各组细胞内活性氧簇(ROS)水平,Western blotting检测ROS-NLRP3信号通路相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β 及TNF-α 的蛋白表达.结果 与对照组比较,LPS组细胞中IL-1β、TNF-α 及NLRP3 mRNA表达水平升高,培养上清液中IL-1β 和TNF-α 的蛋白表达水平升高,细胞内ROS水平升高,且细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β 及TNF-α 的蛋白表达水平升高(P<0.05);与LPS组比较,CGRP 10组、CGRP 30组、CGRP 100组、CGRP 30+LPS组细胞中IL-1β、TNF-α 及NLRP3 mRNA表达水平降低,培养上清液中IL-1β 和TNF-α 蛋白表达水平降低,细胞内ROS水平降低,且细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β 及TNF-α 蛋白表达水平也降低,所有指标中CGRP 30组降低最明显(P<0.05).结论 CGRP可降低巨噬细胞内ROS和NLRP3的表达,使炎症因子IL-1β 和TNF-α 的释放减少,CGRP可能在减弱局部炎症反应中发挥重要的调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖美芳	海南省妇幼保健院检验科	7	1	1.0	1.0
2	林樟萍	海南省妇幼保健院检验科	1	1	1.0	1.0
3	陆喆	海南省妇幼保健院检验科	3	1	1.0	1.0
4	刘乾坤	海南省妇幼保健院检验科	1	1	1.0	1.0