长链非编码RNA DIGIT对血管内皮细胞的作用

• 作者: 宋瑞鹏 张勇敢 曹海峡 李萌 苗超峰
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: GSC分化 动脉粥样硬化 内皮细胞 长链非编码RNA
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1391-1393
• 页数: 3页
• 字数: 2416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.08.015

摘要

目的 观察长链非编码RNA DIGIT对血管内皮细胞的作用.方法 体外培养人微血管内皮细胞(HMEC-1),通过显微镜采图观察管核比值的变化,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和蛋白质印迹法测定血管生成相关因子mRNA和蛋白的表达水平.通过用短发夹RNA(shRNA)靶向的DIGIT转染使HMEC-1中的DIGIT表达沉默,观察DIGIT沉默对细胞活力(锥虫蓝染色法),迁移能力(Trans-Well法),细胞凋亡[膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)凋亡检测法]和管形成能力(显微镜采图法)的影响.结果 HMEC-1培养24h后,管/核的比值随时间增加而增加,血管生成相关因子:内皮细胞生长因子(VEGF),内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR2),CD144和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA水平均显著上调(F=11.813、10.336、13.201、10.125,P＜0.01)、蛋白水平随着时间的推移而累积.与对照组比较,DIGIT沉默组(sh-DIGIT)细胞的存活率显著降低[(80.29±4.68)％比(62.50±4.78)％,F=20.386,P＜0.01],细胞的迁移能力显著降低[(99.65±3.07)％比(37.53±2.78)％,F=33.573,P ＜0.01],细胞的管/核比值显著降低(0.691±0.060比0.192±0.020,F=13.471,P＜0.01),血管生成相关因子VEGF、VEGFR2、CD144和eNOS的蛋白表达水平下降,凋亡抑制基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达下降,凋亡促进蛋白bcl-2相关X蛋白(bax)表达上调,活化半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9表达水平升高.结论 lncRNA DIGIT在内皮细胞中起促生长,促迁移和促管形成因子的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋瑞鹏	郑州大学第一附属医院骨科	34	36	3.0	4.0
2	张勇敢	郑州大学第一附属医院血管外科	12	56	4.0	7.0
3	苗超峰	郑州大学第一附属医院血管外科	9	38	3.0	6.0
4	李萌	郑州大学第一附属医院血管外科	21	34	3.0	5.0
5	曹海峡	郑州大学第一附属医院血液科	4	14	2.0	3.0