摘要:
目的 观察熊果酸(UA)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、迁移、侵袭能力的影响,并探讨其机制.方法 采用0、5、10、20、30、40、50μmol/L的UA作用于A549细胞,计算UA的IC50值,miRNA芯片检测UA诱导前后差异性表达的miRNA.取对数生长期A549细胞并分为4组,A组转染miR-21 inhibitor及加入42μmol/L UA培养,B组转染miR-21 mimic及加入42μmol/L UA培养,C组加入42μmol/L UA培养,D组不给予干预,CCK-8法检测细胞增殖率,划痕实验检测细胞24 h划痕相对宽度,Transwell实验检测细胞穿膜个数,荧光定量PCR法检测细胞第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋P(PTEN)、磷脂酰肌醇三激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)mRNA,Western blotting法检测细胞PTEN、PI3K、AKT蛋白.结果 UA对A549细胞的IC50值为42μmol/L;A549细胞中异常表达的miRNA共34种(上调的20条,下调的14条),选择miRNA-21做后续实验.A组细胞增殖率、24 h划痕相对宽度、穿膜个数分别为43.33% ±8.51%、0.876±0.099、(28.400±7.403)个/HP,B组分别为66.85% ±5.10%、0.445±0.032、(81.400±11.415)个/HP,C组分别为53.49% ±9.72%、0.629±0.051、(42.000±7.348)个/HP,D组分别为100.00% ±12.31%、0.199±0.038、(129.400±5.030)个/HP,C组与其余3组比较,P均<0.05;A组PTEN蛋白、PTEN mRNA、API3K蛋白、API3K mRNA、AKT蛋白、AKT mRNA分别为0.78±0.12、2.90±0.06、0.24±0.08、0.29±0.16、0.17±0.07、0.16±0.16,B组分别为0.21±0.12、0.94±0.05、0.82±0.11、1.21±0.04、0.74±0.08、0.87±0.02,C组分别为0.47±0.09、1.53±0.09、0.50±0.05、0.72±0.09、0.48±0.08、0.48±0.12,D组分别为0.20±0.11、0.96±0.13、0.76±0.07、1.09±0.05、0.74±0.07、1.03±0.10,C组与其余3组比较,P均<0.05.结论 UA能抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能是通过下调miR-NA-21作用于PTEN/PI3K/AKT通路来实现的.