环介导等温扩增技术对HPV16、58亚型进行分型检测

• 作者: 刘金霞 张可欣 杨思熙 王丽娜 苗光新 邢恩宏
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒(HPV) 可视化环介导等温扩增(LAMP) 分型检测 快速检测
• 年，卷（期）: 2019,（20）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 3787-3790,3807
• 页数: 5页
• 分类号: R183
• 语种: 中文

摘要

目的 采用煮沸法处理人宫颈黏液上皮细胞,获得人乳头瘤病毒(HPV)DNA,然后再通过应用可视化环介导等温扩增(LAMP)检测技术对HPV常见基因型16、58的2个亚型进行快速诊断,探讨HPV感染和分型的快速检测技术,以指导HPV感染患者的临床诊断和治疗.方法 收集承德医学院妇科宫颈脱落细胞标本104例,采用直接煮沸法提取HPV DNA.应用LAMP及聚合酶链式反应(PCR)2种诊断技术进行检测,并在LAMP扩增体系中加入钙黄绿素使产物可视化.对检测结果进行特异性和敏感度比较,并计算kappa系数对校测结果的一致性进行分析.结果 成功建立了HPV16、58的可视化LAMP体系,其特异性较好,且钙黄绿素产物与电泳结果一致,HPV16、58 LAMP检测限分别为100拷贝/管和103拷贝/管,与PCR一致性较好(kappa值＞0.7)且无统计学差异(P＞0.05).结论 LAMP对未经纯化的HPV核酸具有较好特异性和敏感度,且操作简单,适合应用于基层.