抑制内质网钙离子释放在诱导巨噬细胞自噬及逆转LPS耐受中的作用

• 作者: 刘鑫 吴嘉麒 王宁 郑江
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: LPS耐受 炎症因子 自噬 钙离子
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20200003

摘要

目的 观察LPS耐受巨噬细胞自噬水平以及抑制内质网Ca2+释放是否具有上调自噬水平和逆转LPS耐受的作用.方法 分离Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞,LPS 5 ng/ml诱导耐受4h,随后给予LPS 100 ng/rr刺激,ELISA检测TNF-α和IL-6水平,Western blot和免疫荧光检测自噬蛋白(Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ)表达水平,Fluo-4 AM探针检测胞内Ca2+浓度;在LPS刺激的同时给予胞内Ca2+螯合剂(BAPTA)或内质网IP3通道阻断剂(2-APB)或CaMKⅡ抑制剂(KN-93),检测对自噬蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ表达以及TNF-α释放的影响.结果 LPS耐受细胞经LPS再次刺激后,TNF-α、IL-6释放明显减少,自噬水平也显著下降,同时胞内Ca2+水平异常增高;给予BAPTA或2-APB或KN-93能够降低胞内Ca2+水平,上调LC3-Ⅱ/Ⅰ表达,增加TNF-α释放.结论 LPS耐受的巨噬细胞自噬水平显著降低,抑制内质网Ca2+通路是上调自噬水平并逆转LPS耐受的有效途径.