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摘要:
crustin是对虾中重要的抗菌肽,本研究获得的carcininPm3属于斑节对虾crustin家族,是一种新型抗菌肽,成熟肽含有92个氨基酸,与其他对虾抗菌肽的同源性小于45%.根据其氨基酸序列和大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的密码子偏好性设计carcininPm3的基因序列,将carcininPm3连接到原核表达载体pSmartI-SUMO上,构建重组表达载体pSmartI-SUMO-carcininPm,再转化至原核表达菌株E.coli BL21(DE3)中,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导SUMO-carcininPm3的融合表达,进一步优化其表达条件,获得表达量大、可溶性高的重组蛋白.通过亲和层析纯化得到重组蛋白,蛋白的质量浓度达到195 μg/mL.利用SUMO酶去除SUMO融合标签,获得没有外源标签的carcininPm3抗菌肽,可用于蛋白功能分析、抗体制备等研究.研究结果为carcininPm3功能的分析及应用提供参考.
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文献信息
篇名 斑节对虾carcininPm3的表达及其无标签多肽的获得
来源期刊 深圳大学学报(理工版) 学科 生物学
关键词 基因工程 斑节对虾 抗菌肽 crustin家族 carcininPm3基因 原核表达 重组蛋白 亲和层析
年,卷(期) 2020,(1) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 9-16
页数 8页 分类号 Q812
字数 6081字 语种 中文
DOI 10.3724/SP.J.1249.2020.01009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李国强 1 0 0.0 0.0
2 周亮 1 0 0.0 0.0
3 李安国 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
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基因工程
斑节对虾
抗菌肽
crustin家族
carcininPm3基因
原核表达
重组蛋白
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研究起点
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