免疫分子B7-H3对人脐静脉内皮细胞功能的影响

• 作者: 傅丰庆 刘翠平 吴萍萍 孙静 杨洁 郭云娣 陈瀚卿
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: B7-H3 慢病毒载体 人脐静脉内皮细胞 增殖能力 迁移能力
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 187-191
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

设计针对B7-H3 1041以及996位点的shRNA,构建相应慢病毒B7-H3载体,研究其表达下调对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)生物学行为的影响.针对B7-H3 mRNA序列设计2对不同位点的shRNA,克隆连接至慢病毒载体中,与穿梭载体LV3共转染至人肾上皮细胞系293T细胞并包装病毒,逐孔稀释法测定病毒滴度.用聚凝胺浸染HUVEC细胞株,real-time PCR、FACS测定靶细胞B7-H3及其蛋白表达抑制情况,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验分析其迁移能力.结果 显示,慢病毒载体可抑制B7-H3及其蛋白的表达,抑制率超过84.7％;CCK-8实验显示B7-H3表达降低后HUVEC的增殖和迁移能力明显降低.以上发现可为进一步研究该分子的生物学功能及其在RA中的作用奠定基础.