抑制低密度脂蛋白受体相关蛋白2表达对Alzheimer's病细胞模型丝裂原活化蛋白激酶信号通路影响的机制研究

• 作者: 李焰生 王丽玲 王鹏飞
• 来源期刊: 临床神经病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低密度脂蛋白受体相关蛋白2 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 分类号: R749.1
• 字数: 6054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1648.2020.01.011

摘要

目的 探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白2(LRP2)在 β 淀粉样蛋白(Aβ)诱导的Alzheimer's病(AD)细胞模型中的表达情况,及调控LRP2表达后对神经元存活影响及其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的影响.方法 采用20μmol Aβ1-42处理的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞作为AD细胞模型.采用Western blotting法检测LRP2蛋白表达情况.Scrambled siRNA和LRP2 siRNA(siLRP2)分别转染SH-SY5Y细胞48 h,随后予以Aβ1-42处理24 h,采用噻唑蓝比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blotting法检测ERK、p38及JNK的磷酸化水平.结果 siLRP2+Aβ 组细胞活力显著低于SC+Aβ 组(P<0.05).与处理前比较,Aβ1-42处理后LRP2蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与空白对照组比较,siRNA-1组、siRNA-2组LRP2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05～0.01).SC+Aβ组细胞凋亡率显著低于siLRP2+Aβ组(P<0.01).SC+Aβ组及siLRP2+Aβ组(p-ERK1/2)/ERK与SC组及siLRP2组比较,差异无统计学意义(均P>0.05).与SC+Aβ组相比,siLRP2+Aβ组(p-ERK1/2)/ERK亦无统计学差异(P>0.05).SC+Aβ组及siLRP2+Aβ组p-p38/p38显著高于SC组及siLRP2组(均P<0.01).与SC+Aβ组相比,siLRP2+Aβ组p-p38/p38无统计学差异(P>0.05).SC+Aβ组及siLRP2+Aβ组p-JNK/JNK显著高于SC组及siLRP2组(均P<0.01).与SC+Aβ组比较,siLRP2+Aβ组p-JNK/JNK显著增高(P<0.01).未经JNK抑制剂处理的SC组、siLRP2组细胞的Cleaved Caspase-3相对表达与经JNK抑制剂处理的细胞差异无统计学意义(均P>0.05).结论 抑制LRP2后促进Aβ 诱导的细胞凋亡,并且这种效应与ERK、p38磷酸化无明显相关,与JNK磷酸化相关,但JNK抑制剂不能逆转LRP2抑制导致的凋亡增加,提示JNK信号通路可能不直接发挥作用.