阿魏酸对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的影响

• 作者: 邬钰 陈珺 陈胜柱 陈艳芳 陈艳莉 黄宏靓
• 来源期刊: 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阿魏酸 过氧化氢 氧化损伤 成骨细胞
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 140-147
• 页数: 8页
• 分类号: R683
• 字数: 5347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2591.2020.02.006

摘要

目的 研究阿魏酸(ferulic acid,FA)对过氧化氢诱导氧化损伤的成骨细胞功能的影响.方法 酶消化法分离提取大鼠颅骨成骨细胞并进行体外传代培养,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红(alizarin red S,ARS)染色进行细胞鉴定;通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定细胞存活率及ALP检测试剂盒检测ALP分泌,并筛选出适合的过氧化氢损伤浓度和FA作用浓度.将细胞分为对照组(C组)、氧化损伤模型组(M组)和FA给药组(M+FA组),流式细胞术检测各组成骨细胞内活性氧簇(re-active oxygen species,ROS)含量,ARS染色检测各组钙化结节形成大小,并以实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)检测成骨功能相关基因的表达情况.结果 (1)确定过氧化氢致损浓度为200μmol/L、作用时间1 h;FA给药浓度为640μmol/L,作用时间为72 h.(2)与C组相比,M组成骨细胞的存活率降低了60％(P<0.0001),细胞培养上清液中ALP含量显著降低(P<0.0001),细胞ROS含量上升约为C组3倍,细胞着色变浅、未能生成明显的钙化结节,成骨特异性转录因子(runt-related tran-scription factor 2,RUNX-2)、骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)、成骨相关转录因子(osterix,OSX)等成骨功能相关基因的表达亦有所降低;与M组相比,M+FA组成骨细胞的存活率显著提高(P<0.01),细胞上清液中ALP含量显著提高(P<0.01),ROS含量降低了一半,钙化结节数量增加、细胞着色加深,成骨功能相关基因OPG、OSX的表达均显著升高(P<0.05),但FA对RUNX-2表达无明显影响.结论 FA干预能明显改善过氧化氢所致氧化损伤成骨细胞的存活能力,增加细胞ALP分泌水平和细胞体外矿化能力,亦明显上调成骨功能相关基因的表达.