超滤法透析Y群脑膜炎球菌荚膜多糖的研究

• 作者: 王玺 张轶 王剑虹 程新 任克明 张新庄 王晶 侯亚莉 刘方蕾 罗树权
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 关键词: 超滤 透析 Y群脑膜炎球菌荚膜多糖 氯化钙
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-24
• 页数: 4页
• 分类号: R378.1+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2020.06.004

摘要

目的 对超滤法透析Y群脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)荚膜多糖的方法进行优化.方法 分别用恒压恒体积和恒泵速恒体积法、以0.5 mol/L氯化钙溶液和注射用水为透析液超滤Y群脑膜炎球菌荚膜多糖苯酚抽提上清液,耗用透析液体积5倍于料液体积时停止超滤,超滤结束后,向氯化钙超滤样品中直接加入乙醇沉淀多糖,向注射用水超滤样品中加入氯化钙溶液后再加入乙醇沉淀多糖.比较各种超滤方法透析过程中的膜包水通量、透析耗用时间和超滤器进口压力的变化.比较各种超滤方法所获多糖的收获量、唾液酸和O-乙酰基含量以及蛋白质、核酸、内毒素和苯酚残留量.结果 在恒压恒体积模式超滤中,用0.5 mol/L氯化钙溶液超滤膜包水通量逐步降低,7 min后维持在421 mL/(m2·min);用注射用水超滤时,膜包水通量逐步升高,7 min后维持在725 mL/(m2·min);完成5倍体积透析液透析后,0.5 mol/L氯化钙透析耗时20 min,注射用水透析耗时13 min.在恒泵速恒体积模式超滤中,用0.5 mol/L氯化钙超滤时,超滤器进口压力逐步升高,11 min后维持在0.59 bar(注:1 bar=105 Pa);用注射用水超滤时,超滤器进口压力逐渐降低,9 min后维持在0.22 bar;各种超滤方法对精制多糖的收量、生化指标、内毒素和苯酚残留量均无影响.结论 先用注射用水恒压恒体积模式超滤,然后再加入氯化钙的方法能有效缩短超滤时间,减少氯化钙用量,且不影响各种生化指标.