巨噬细胞极化中特异性分子表达的实验研究

• 作者: 吴惠娟 张盛昔 王乐旬 胡因铭 郭姣 韦曲星
• 来源期刊: 广东药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞 极化 分子标记 信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 药理学
• 页码范围: 43-49
• 页数: 7页
• 分类号: R392.12|R-33
• 字数: 4258字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16809/j.cnki.2096-3653.2019121103

摘要

目的 探讨不同极化方法诱导下,巨噬细胞特异性分子标记的表达模式.方法 提取小鼠骨髓原代细胞,利用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,10 ng/mL)诱导7 d后,将细胞分为对照组、脂多糖(LPS,100 ng/mL)+干扰素γ(INF-γ,10 ng/mL)处理组、白细胞介素4(IL-4,20 ng/mL)和IL-13(10 ng/mL)处理组、LPS(100 ng/mL)和免疫复合物(IC,50 ng/mL)处理组、IL-10(10 ng/mL)处理组,通过Q-PCR和ELISA检测相关分子标记的表达情况,利用Western blot和流式细胞技术分别检测相关信号通路和细胞表面特异性分子的表达改变.结果 M-CSF诱导后,表达巨噬细胞特征性分子F4/80的细胞占(91.4±5.65)％.和其他组相比,CXC趋化因子9(CXCL9)的mRNA和蛋白水平在LPS联合INF-γ诱导的M1巨噬细胞中显著增高(均P<0.01),CC趋化因子17(CCL17)的mRNA和蛋白水平在IL-4和IL-13诱导的M2a细胞中增加最明显(均P<0.01),CCL1的mRNA和蛋白水平(均P<0.01)和IL-10的mRNA转录水平(P<0.01)在LPS和IC诱导的M2b细胞中表达最高,CXCL13的mRNA和蛋白水平在IL-10刺激的M2c细胞中显著增加(均P<0.01).流式结果显示,CD38蛋白只在M1中表达,CD206蛋白在M2a、M2b和M2c中均有表达,而LIGHT蛋白只在M2b中表达.LPS联合INF-γ可诱导p65蛋白的磷酸化增加,而LPS和IC处理能够增加ERK蛋白的磷酸化水平.结论 CXCL9和CD38可作为M1巨噬细胞的特征性分子,CCL17可作为M2a细胞的特征性分子,CCL1和LIGHT可作为M2b细胞的特征性分子,CXCL13可作为M2c的特征性分子.