摘要:
目的 探讨人类稀少精子冷冻改良快速冷冻载体的实验研究,为重度少弱精子症患者的精子冷冻保存提供参考.方法 2018年12月至2019年8月,在联勤保障部队第九〇〇医院生殖中心就诊的男性不育症患者:根据精液质量分为正常精液组和少弱精液组,每个实验样本选取3份精液分别进行充分混合,将混合精液稀释至浓度为(1~2)×106/ml,实验共计选取81份正常精液标本混匀稀释形成27个正常精液样本,选取54份少弱精液标本混匀稀释形成18个少弱精子样本.根据不同的冷冻载体各分3组进行精子冷冻:薄片精子冷冻管组(A组),麦管微量体积冷冻组(B组),改良快速冷冻载体组(C组),均采用商品化精子冷冻试剂1:1混匀,熏蒸法后快速冷冻.比较3种载体冷冻复苏后,精子的活动力、存活率、DNA碎片指数和正常形态变化、精子顶体酶活性等指标变化,以评估改良快速冷冻载体的冷冻效率及安全性.统计学方法采用t检验、ANOVA分析、LSD多重比较.结果 正常精液组的3种冷冻方法都会造成精子质量下降.正常精液组的C组的复苏后精子活动力、存活率均高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05).正常精液组:C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C3组复苏后精子正常形态率均低于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.05).少弱精液组:A、B两组复苏后精子DNA碎片指数均高于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.01);C组精子DNA碎片指数高于冷冻前,但差异无统计学意义(P=0.068),C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C3组冷冻精子复苏后正常形态率均低于冷冻前,差异无统计学意义(P>0.05).正常精液组:冷冻前精子顶体酶活性为(123.6±12.8)IU/106个精子,复苏后A、B、C3组顶体酶活性均有下降,分别为(74.7±15.6)、(84.7±13.5)、(91.2±16.2)IU/106个精子,差异有统计学意义(F=37.896,P<0.001),从对于精子顶体影响看,B、C组优于A组,差异有统计学意义(P=0.043、P=0.001).结论 改良快速冷冻载体对于稀少精子冷冻保存有一定优势,值得进一步探讨研究.