炎症微环境对大鼠间充质干细胞增殖及Sirt6表达水平的影响

• 作者: 于素平 刘雪阳 王开 荆得宝
• 来源期刊: 口腔颌面外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 炎症微环境 大鼠间充质干细胞 沉默信息调控因子6 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 150-155
• 页数: 6页
• 分类号: R782
• 字数: 4518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4979.2020.03.005

摘要

目的:分析沉默信息调控因子6(silent information regulator 6,Sirt6)在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达情况,以及炎症微环境对其表达水平的影响,为研究Sirt6在牙周炎症条件下骨形成中的作用提供理论依据.方法:根据实验分为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导组、对照组和LPS过表达Sirt6组.经10μg/mL LPS刺激6、12、24、48、72 h,建立细胞的炎症微环境;CCK-8法检测细胞的增殖水平;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;免疫荧光技术检测Sirt6的分布情况;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、蛋白质印迹法(western blot)检测Sirt6在大鼠BMSCs中信使RNA(mRNA)及蛋白的表达水平.结果:10μg/mL LPS刺激BMSCs后,成功建立炎症微环境;与对照组相比较,CCK-8法检测到炎症微环境中BMSCs的增殖速率由增高逐渐趋于下降,炎症因子抑制了BMSCs的增殖速率(P<0.05),而过表达Sirt6则升高BMSCs的增殖速率(P<0.05);ELISA结果显示,随着时间的推移,炎症微环境中的TNF-α、IL-1β、IL-6含量逐渐下降(P<0.05),表明BMSCs对炎性因子具有调控作用;炎症微环境中,免疫荧光染色显示Sirt6的表达未受到明显抑制;RT-PCR结果显示,LPS过表达Sirt6组中,Sirt6的mRNA表达水平显著升高,且在不同时间点内Sirt6的mRNA表达水平呈现显著性升高;Western blot结果显示,同一时间点LPS诱导组中Sirt6蛋白的表达均出现下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而且随着时间的推移,Sirt6的蛋白表达并没有出现显著性下降,差异无统计学意义(P>0.05).结论:炎症因子可以通过抑制Sirt6蛋白的表达影响BMSCs的增殖作用,BMSCs中Sirt6也具有调控炎症因子的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王开	第二军医大学附属公利医院口腔科	5	2	1.0	1.0
2	荆得宝	第二军医大学附属公利医院口腔科	2	1	1.0	1.0
3	于素平	第二军医大学附属公利医院口腔科	3	1	1.0	1.0
4	刘雪阳	第二军医大学附属公利医院口腔科	2	1	1.0	1.0