水稻抽穗期基因OsDof6功能的初步研究

• 作者: 刘建丰 宋书锋 张立成 李懿星 李磊 李莉 王天抗 董皓 邱牡丹
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 Dof家族 抽穗期 CRISPR/Cas9
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 397-405
• 页数: 9页
• 分类号: Q755|S511.01
• 字数: 5799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16819/j.1001-7216.2020.0211

摘要

[目的]以前期通过穗发育芯片筛选到一个水稻Dof家族转录因子OsDof6为研究对象,进一步探究OsDof6的表达模式与生物学功能.[方法]对OsDof6的基因、蛋白及启动子序列进行生物信息学分析,利用CRISPR/Cas9技术对该基因进行定点编辑,通过实时定量PCR和亚细胞定位技术分析该基因的表达模式.[结果]对该基因的启动子序列分析表明,该基因启动子中存在大量与光响应、激素响应及胁迫响应相关的顺式调控元件.利用CRISPR/Cas9技术获得了2种不同突变类型的功能缺失突变体9522Dof6-3和9522Dof6-4.对突变体T1株系进行表型观察发现,相较于对照,两种突变体在营养生长阶段分蘖数明显降低,转入生殖生长阶段后,两种突变体的抽穗时间推迟约3 d.实时定量PCR结果显示OsDof6在水稻根、茎、叶和穗中均有不同程度的表达,在穗发育后期相对表达量明显提高;通过亚细胞定位分析发现OsDof6定位于细胞核.[结论]初步判断OsDof6基因会影响水稻分蘖数与抽穗期.