草氨酸钠对胆管癌细胞自噬与凋亡的影响

• 作者: 于亚平 何大伟 何敖林 周明慧 张明华
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 草氨酸钠 胆管癌 乳酸脱氢酶A 细胞自噬 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 403-409
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.05.007

摘要

目的 观察乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)抑制剂草氨酸钠对人胆管癌细胞株Hucct-1自噬与凋亡的影响,并初步探讨其相关机制.方法 用不同浓度的草氨酸钠处理Hucct-1细胞,或将LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测自噬相关mRNA和蛋白的表达水平,乳酸检测试剂盒检测细胞内乳酸的含量.结果 草氨酸钠抑制Hucct-1细胞增殖(P＜0.01),并呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为50 mmol/L.用50 mmol/L草氨酸钠干预Hucct-1细胞或LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,LDHA mRNA和蛋白表达水平均降低(均P＜ 0.01),细胞内乳酸的含量减少(P＜0.01),细胞凋亡率升高(P＜0.01),细胞迁移距离缩短(P＜0.01),细胞中自噬相关基因7(autophagy-related gene7, ATG7)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Ⅱ,LC-3 Ⅱ)表达水平升高(均P＜0.01),P62蛋白表达水平降低(P＜0.01).结论 草氨酸钠通过抑制Hucct-1细胞中LDHA表达来促进细胞自噬,诱导细胞凋亡.