miR-5581-5p/TRIM22在急性早幼粒细胞白血病细胞分化中的作用

• 作者: 姜国胜 孙王男 王文凤 都鹏超 齐福
• 来源期刊: 国际肿瘤学杂志
• 关键词: 急性早幼粒细胞白血病 细胞分化 miR-5581-5p TRIM22
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 129-134
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2020.03.007

摘要

目的 探究在急性早幼粒白血病(APL)细胞向粒系细胞终末分化过程中,miR-5581-5p的功能及其与三基序蛋白22(TRIM22)的相互作用.方法 利用全反式维甲酸(ATRA)诱导APL细胞(NB4)向粒系细胞分化,以二甲基亚砜作为对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blotting检测分化前后TRIM22的表达变化,qRT-PCR检测分化前后miR-5581-5p的表达变化.通过细胞转染miR-5581-5p mimic和inhibitor调控miRNA表达,并设阴性对照,qRT-PCR验证调控效果,荧光素酶结合实验检测二者是否存在靶向结合,Western blotting检测miRNA差异表达后对TRIM22的表达影响.流式细胞术检测调控miR-5581-5p对ATRA诱导的NB4细胞分化的影响.结果 ATRA诱导NB4细胞向粒系细胞分化后,TRIM22在基因水平表达量较对照组明显升高(24.56 ±2.80vs.1.02±0.13;t=8.392,P=0.001),在蛋白水平表达量也较对照组明显升高(0.80±0.01vs.0.17±0.01;t=44.900,P＜0.001).而NB4细胞诱导分化后miR-5581-5p在基因水平表达量明显低于对照组(0.14±0.02vs.1.01 ±0.08;t=10.840,P＜0.001).双荧光素酶报告基因结果显示,共转染miR-5581-5p mimic和TRIM22 WT组的荧光素酶活性明显低于共转染miR-5581-5p mimic和TRIM22 MUT组(0.73 ±0.02vs.0.98±0.03;t=7.534,P=0.002).Western blotting检测发现,转染miR-5581-5p inhibitor后,TRIM22表达较阴性对照明显升高(0.44±0.01 vs.0.21 ±0.01;t =18.290,P＜0.001);转染miR-5581-5p mimic后,TRIM22表达较阴性对照明显下降(0.62 ±0.01 vs.0.80 ±0.02;t =6.402,P=0.003).ATRA作用后miR-5581-5pmimic组CD11b表达量明显低于对照组(45.80±1.80vs.56.61±1.88;t=4.159,P=0.014),而miR-5581-5p inhibitor组CD11b表达量明显高于对照组(66.48±2.54 vs.52.60±1.70;t=4.539,P=0.011).结论 miR-5581-5p靶向结合TRIM22 3'UTR区,通过负性调控机制影响TRIM22的表达.下调miR-5581-5p可增加TRIM22的表达,从而促进ATRA诱导的NB4细胞粒系分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	都鹏超	滨州医学院免疫学教研室	23	19	3.0	3.0
2	孙王男	滨州医学院免疫学教研室	4	1	1.0	1.0
3	齐福	滨州医学院免疫学教研室	2	1	1.0	1.0
4	王文凤	滨州医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0
5	姜国胜	滨州医学院免疫学教研室	5	1	1.0	1.0