羊口疮病毒B小鼠的免疫应答及IL-2对其作用影响的研究

• 作者: 包涛涛 包细明 吴伯梅 张友 张益 李婷 杨倩 闵德省 饶体宇 鲜思美
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: OrfV B2L基因 F1L基因 IL-2 融合表达 免疫应答
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 168-174
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5863字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201907009

摘要

为评价羊口疮病毒(orfv)B2L、F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L免疫小鼠诱导的体液和细胞免疫应答及IL-2对其免疫作用的影响.本研究将构建的pVAX1-B2L-F1L真核质粒转染MDBK细胞后,采用RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)检测B2L-F1L融合基因在MDBK细胞中的表达;将pVAX1-B2L-F1L、pVAX1-B2L-F1L+pVAX1-IL-2、pVAX1空载体、生理盐水对照组KM系小鼠通过后腿肌肉注射的方式免疫,采用ELISA方法检测免疫小鼠血清中OrfV特异性抗体以及Th1型(IL-2、IFN-γ)、Th2型(IL-4、IL-6)细胞因子;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应.结果 显示,pVAX1-B2L-F1L重组质粒能够在MDBK细胞中表达;pVAX1-B2L-F1L+pVAX1-IL-2联合免疫组小鼠血清抗体及IL-2和IFN-γ水平均显著高于pVAX1-B2L-F1L组;该联合免疫组小鼠血清IL-4、IL-6细胞因子水平与pVAX1-B2L-F1L组相比差异不显著(p＞0.05);该联合免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平高于pVAX1-B2L-F1L组(p＜0.05).由此表明,pVAX1-B2L-F1L能够诱导小鼠产生OrfV特异性体液免疫和细胞免疫应答,联合pVAX1-IL-2诱导的免疫反应以细胞免疫应答为主,且能够促进Th1型细胞因子的分泌.本研究为OrfV基因工程疫苗的研制提供了参考依据.