孢子丝菌病快速诊断方法的探究

• 作者: 刘晓明 吴永卓 张振颖
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 申克孢子丝茵 基因组DNA提取 聚合酶链反应 DNA引物 钙调蛋白基因
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: R756.6
• 字数: 3162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-3827.2020.01.006

摘要

目的 研究申克孢子丝菌DNA提取方法;探索申克孢子丝茵的种特异性引物,运用聚合酶链反应方法鉴定申克孢子丝菌;从而为临床孢子丝茵病的分子诊断奠定基础.方法 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌的基因组DNA;根据申克孢子丝茵钙调蛋白基因序列设计一对寡核苷酸引物,分别对52株申克孢子丝菌及3种6株普通真茵的基因组DNA进行PCR扩增.结果 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁成功提取出孢子丝菌的基因组DNA.特异性引物对52株申克孢子丝菌可扩增出一条约430 bp的片段,而对念珠菌、曲霉、黑霉基因组DNA扩增结果均为阴性.结论 用Viscozyme L酶替代液氮研磨破壁提取孢子丝菌基因组DNA与传统的CTAB法相比不仅操作更简便,而且避免了液氮研磨过程中难于避免的污染.运用我们所设计的特异性引物,结合PCR方法对申克孢子丝菌进行分子鉴定,结果显示不仅该引物对申克孢子丝菌特异、敏感而且该方法简便、快捷;可用于申克孢子丝菌病的临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓明		111	578	12.0	19.0
3	张振颖		26	79	5.0	8.0
9	吴永卓		8	1	1.0	1.0