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摘要:
目的 探讨同源异形盒A 1(HOXA1)基因反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及机制.方法 采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测正常食管上皮细胞Het-1A和人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白的表达,筛选高表达的食管鳞癌细胞进行后续实验;设计合成HOXA 1 ASODN链、正义寡核苷酸(SODN)链及无义寡核苷酸(N-ODN)链;将筛选出的高表达的食管鳞癌细胞分为HOXA1 ASODN组(5、10、15μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞)、对照组(细胞常规培养,不进行细胞转染)、SODN组(细胞转染15 μmol/L的SODN)和N-ODN组(细胞转染15 μmol/L的N-ODN).采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell小室分别检测细胞活力、凋亡率及侵袭迁移能力;Western blot检测HOXA1、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)、细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.结果 与正常食管上皮细胞Het-1A比较,人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05).HOXA1蛋白在Eca109细胞表达最高,因此选用Eca109细胞进行后续实验.转染HOXA1 ASODN的Eca109细胞HOXA1蛋白表达降低(P<0.05).随着Eca109细胞转染HOXA1 ASODN浓度及时间增加,Eca109细胞活力降低,与对照、SODN、N-ODN组比较差异有统计学意义(P<0.05).15μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞后,与对照组比较,细胞侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高,p-AKT、PCNA和MMP-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05).结论 HOXA1基因反义寡核苷酸可抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,并诱导凋亡,机制与抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号通路可能有关.
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反义寡核苷酸
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文献信息
篇名 HOXA1基因反义寡核苷酸对食管癌细胞生长的影响
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科
关键词 食管癌 HOXA1基因 凋亡 侵袭和迁移 PI3K/AKT信号通路
年,卷(期) 2020,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 24-29
页数 6页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.12182/20200160601
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王彦霞 6 10 2.0 3.0
2 张春强 2 0 0.0 0.0
3 韩菲 6 6 1.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
食管癌
HOXA1基因
凋亡
侵袭和迁移
PI3K/AKT信号通路
研究起点
研究来源
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相关学者/机构
期刊影响力
四川大学学报(医学版)
双月刊
1672-173X
51-1644/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-72
1959
chi
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