微RNA-24对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞凋亡的影响及作用机制

• 作者: 李丹 杨鹏 欧和生 沈凤 罗雪兰 赵燕姣 陶晓静 颜渊鸳
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微RNA-24 人脐静脉血管内皮细胞 过氧化氢 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-15
• 页数: 9页
• 分类号: R966
• 字数: 5486字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.01.002

摘要

目的 探讨微RNA-24(miR-24)对H2O2诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)存活、迁移和凋亡的影响及作用机制.方法 通过转染miR-24高表达、miR-24抑制物(anti-miR-24)及其阴性对照慢病毒质粒(miR-24 NC)构建稳转细胞,3种细胞用H2O2500μmol·L-1处理12 h.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,划痕实验检测细胞迁移率,Hoechst33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-24,Bax,Bcl-2和胱天蛋白酶3 mRNA表达水平,Western印迹法和免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2和胱天蛋白酶3蛋白表达水平.结果 与miR-24 NC组比,miR-24高表达组miR-24表达升高(P<0.05),而anti-miR-24组降低(P<0.05).与正常对照组比,H2O2组细胞凋亡率增加(P<0.05)、细胞存活和迁移率降低(P<0.05),表明氧化损伤模型构建成功.与H2O2+miR-24 NC组比,H2O2+miR-24高表达组上述指标较H2O2+miR-24 NC组升高(P<0.05),促凋亡蛋白Bax和胱天蛋白酶3 mRNA与蛋白表达量增加,抑凋亡蛋白Bcl-2 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而H2O2+anti-miR-24组可降低细胞凋亡率、增加细胞存活和迁移率,降低Bax和胱天蛋白酶3 mRNA与蛋白表达水平,增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05).结论 氧化应激状态下,miR-24可通过上调Bax、胱天蛋白3表达和下调Bcl-2蛋白表达,促进HUVEC凋亡和抑制其存活和迁移能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丹	广西医科大学药学院	15	12	2.0	3.0
2	欧和生	广西医科大学药学院	27	72	5.0	6.0
3	杨鹏		9	0	0.0	0.0
4	颜渊鸳	广西医科大学药学院	6	3	1.0	1.0
5	赵燕姣	广西医科大学药学院	2	0	0.0	0.0
6	陶晓静	广西医科大学药学院	6	15	3.0	3.0
7	沈凤	广西医科大学药学院	7	18	3.0	3.0
8	罗雪兰		4	1	1.0	1.0