基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计

• 作者: 俞利平 周祥 孙筱品 宋晓明 戴方伟 杨伟伟 桂飞 汪海燕
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠肝炎病毒 隔离检疫 哨兵鼠 检测
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R394-3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2020.01.007

摘要

目的 以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计.方法 用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20)28 d,进行脏垫料接触感染.之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析.结果 对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20％),第28天阳性检出率达到最高,为80％,第42天阳性检出率为50％,至第56天无阳性检出.血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50％).对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20％小鼠粪便中检出MHV.而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体.结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠.由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法.