红斑丹毒丝菌分离鉴定及主要保护性抗原基因遗传进化分析

• 作者: 张莹 文雪霞 杨婷婷 邵晴青 陈旭 陈晓月
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 红斑丹毒丝菌 spaA 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 257-264
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2020.03.001

摘要

红斑丹毒丝菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)是引起急性、热性猪丹毒的病原菌,是人兽共患病的病原.猪丹毒临床症状和病理变化与非洲猪瘟的症状和病理变化极为相似,容易混淆.从病死猪的肝脏和肺脏中分离到两株革兰氏阳性短杆菌,进行生化试验和药敏试验,并扩增16S rDNA和主要表面保护性抗原(spaA)基因并测序.将纯化后的细菌接种小鼠,测定分离菌的致病性.以国内外已发表的32条spaA基因序列为参考,用DNAstar软件分析分离菌spaA基因的遗传进化关系.登录生物信息学网站在线预测spaA蛋白三级结构.结果表明:两株分离株16S rDNA基因序列与GenBank中丹毒丝菌序列同源性达90％以上,确定为丹毒丝菌,分别命名为LN201801和LN201802.分离菌株均能分解葡萄糖、果糖、乳糖,不分解蔗糖、甘露醇和山梨醇,MR试验和V-P试验均为阴性.LN201801和LN201802对青霉素和头孢噻肟高度敏感,对杆菌肽、恩诺沙星、阿奇霉素耐药.分离菌株spaA基因长1881bp,与已知强毒株Fujisawa序列同源性为99.9％.系统进化树分析表明,LN201801、LN201802与合肥分离株、安徽分离株、湖南分离株、 湖北分离株位于同一分支上,提示该病可能存在跨地区传播.蛋白质在线预测结果显示,spaA蛋白分子量为72.294ku,分子式为C3260H5104N854O956S23,为脂溶性蛋白,性质稳定.该蛋白有337个B细胞表位,两个主要结构域(domain).本研究为猪丹毒的诊断和治疗提供了方法,为该病的防控和开发亚单位疫苗提供候选菌株.