新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM/IgG抗体检测试剂的研制及性能评价

• 作者: 向乐 张赛 李林海 李辉军 王刚 钱纯亘
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 新型冠状病毒 抗体 胶体金 免疫层析
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.2006044

摘要

目的:建立新型冠状病-毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV) IgM/IgG胶体金抗体联合检测试剂的制备方法,并对检测试剂的性能指标进行评价.方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,分别用刺突蛋白(S蛋白)受体结合域(receptor binding domain,RBD)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)作为标记抗原,硝酸纤维素膜上包被鼠抗人IgM单抗(M线)和鼠抗人IgG单抗(G线),并用二硝基苯酚-牛血清白蛋白(DNP-BSA)和兔抗DNP多抗为独立C线质控系统制备胶体金检测试剂;比较RBD蛋白和NP蛋白临床测试符合率,选取较优抗原制备检测试剂,对试剂交叉、干扰反应性,加速稳定性及临床诊断特异性和灵敏度进行性能评价.结果:RBD蛋白临床测试总符合率98.48％(389/395);NP蛋白临床测试总符合率89.11％(352/395),RBD蛋白总符合率高于NP蛋白.选用RBD蛋白制备检测试剂盒,与13种常见病原体抗体阳性样本均无交叉反应;样本中的甘油三酯、血红蛋白、胆红素、类风湿因子(RF)、人抗鼠抗体(HAMA)、抗核抗体(ANA)对测试结果无干扰.试剂盒50℃加速破坏6周稳定.临床确诊样本及排除样本测试,IgM灵敏度为78.31％ (65/83),特异性为98.90％ (721/729);IgG灵敏度为92.77％(77/83),特异性为99.31％ (724/729);IgM和IgG联合检测灵敏度为92.77％(77/83),特异性为98.35％(717:29);一致性检验Kappa值为0.883 0,P＜0.05.结论:2019-nCoV IgM/IgG抗体检测试剂(胶体金法)检测性能的特异性和灵敏度高,检测速度快,操作便携,可作为已有的2019-nCoV核酸检测法的补充手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李辉军		25	127	5.0	10.0
2	李林海		17	24	3.0	4.0
3	张赛		1	0	0.0	0.0
4	向乐		1	0	0.0	0.0
5	王刚		1	0	0.0	0.0
6	钱纯亘	华中科技大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0