长链非编码RNA MIF-AS1调控非小细胞肺癌增值、侵袭和转移的机制研究

• 作者: 张全 徐磊 李基伟 李赛赛 祝子博 魏立
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 非小细胞肺癌 长链非编码RNA MIF-AS1 微小RNA-370-3p 丝裂原活化蛋白激酶9 增殖 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2020.01.022

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(IncRNA) MIF-AS1/微小RNA(miRNA,miR)-370-3p/丝裂原活化蛋白激酶9(MAP3K9)分子轴调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖、侵袭及迁移的分子机制.方法 收集河南省人民医院2017年5月至2019年1月NSCLC患者20例标本,其中男12例,女8例,年龄(52.37±10.34)岁.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测NSCLC患者癌组织及9例细胞株中MIF-AS1、miR-370-3p、MAP3K9的表达水平;分别用si-MIF-AS1、si-NC、si-MIF-AS1+抗-miR-370-3p或si-MIF-AS1+ pcDNA-MAP3K9转染A549细胞,采用噻唑蓝(MTT)法、Transwell实验检测转染细胞的增殖、侵袭、迁移能力;Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白的表达;双荧光素酶报告基因验证MIF-AS1对miR-370-3p或miR-370-3p对MAP3K9的靶向调控作用,应用SPSS 21.0统计软件分析.结果 MIF-AS1、MAP3K9在NSCLC组织(2.49±0.25、2.24±0.22)及A549(2.54±0.24、2.31±0.23)、H1299(2.11±0.21、2.44±0.24)、PC-9细胞(2.26±0.23、2.16±0.22)中的表达较癌旁组织(1.00±0.09、1.02±0.09)、正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.01±0.09、1.00±0.09)明显升高(t=25.078,P＜0.05;F=94.367,P＜0.05),差异有统计学意义.miR-370-3p在NSCLC组织(0.42±0.04)及A549(0.34±0.03)、H1299 (0.53 ±0.05)、PC-9细胞(0.44±0.04)中的表达较癌旁组织(1.01±0.08)、正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.00±0.08)明显降低(t=29.500,P＜0.05;F=269.552,P＜0.05),差异有统计学意义;转染si-MIF-AS1显著抑制NSCLC细胞增殖(24h:0.27±0.03,48 h:0.36±0.03,72 h:0.48±0.04)、侵袭[(24.33±3.14)个]及迁移[(32.46±3.34)个]能力(P＜0.01),差异有统计学意义,上调p21 (0.64±0.06)、p27 (0.77 ±0.07)蛋白的表达(t=17.441,P＜0.05;t=17.726,P＜0.05),差异有统计学意义,下调Cyclin D1 (0.29±0.03)、MMP-2(0.25±0.03)、MMP-9(0.34 ±0.03)、MMP-14(0.29±0.03)蛋白的表达(t=17.732,P＜0.05),差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因证实MIF-AS1与miR-370-3p靶向结合,以及miR-370-3p与MAP3K9靶向结合;转染si-MIF-AS1+抗-miR-370-3p或si-MIF-AS1+ pcDNA-MAP3K9后可抑制si-MIF-AS1对NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移的作用.结论 LncRNA MIF-AS1通过调控miR-370-3p/MAP3K9分子轴促进NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏立	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	34	165	7.0	11.0
2	李基伟	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	8	19	2.0	4.0
3	徐磊	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	7	82	4.0	7.0
4	张全	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	4	21	3.0	4.0
5	祝子博	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	1	0	0.0	0.0
6	李赛赛	河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科	1	0	0.0	0.0