Survivin对分流型肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖作用及机制研究

• 作者: 劳金泉 庞玉生 黄静林
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肺动脉高压 survivin RNA干扰 增殖 大鼠
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 837-842
• 页数: 6页
• 分类号: R544.1
• 字数: 4134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.05.011

摘要

目的:通过RNA干扰抑制分流型肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中survivin的表达,探索survivin基因对PASMCs增殖作用的影响及其机制.方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、假手术组和分流组,正常组大鼠不做处理,假手术组大鼠开腹后予夹闭腹主动脉10 min,分流组用腹主动脉-下腔静脉分流术建立肺动脉高压大鼠模型.术后饲养11周后,通过测定大鼠右心室压力、右心室肥厚指数及肺小动脉苏木精-伊红(HE)染色评估模型建立情况.提取各组大鼠肺动脉进行PASMCs原代培养,并通过siRNA干扰技术将分流组大鼠PASMCs在细胞层面上分为分流组、分流+空载病毒组和分流+慢病毒干扰组.用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot分别检测survivin mRNA及蛋白在5组细胞中的表达;CCK-8法检测5组细胞的增殖水平.酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中caspase-9、caspase-3浓度.结果:分流组大鼠的右心室压力、右心室肥厚指数均较正常组和假手术组明显增高(P＜0.05),分流组大鼠肺动脉较正常组和假手术组明显增厚.正常组和假手术组的PASMCs均未见survivin mRNA及蛋白表达,分流组为阳性表达.分流+慢病毒干扰组survivinmRNA及蛋白表达水平较分流组、分流+空载病毒组明显下降(P＜0.05),分流组、分流+空载病毒组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CCK-8法分析,分流组PAMSCs在接种48 h及之后较正常组和假手术组吸光度值明显增加(P＜0.05),正常组和假手术组在各个时间节点比较,差异无统计学意义(P＞0.05),分流+慢病毒干扰组PASMCs在接种48h及之后吸光度值较分流组、分流+空载病毒组明显下降(P＜0.05),分流组和分流+空载病毒组在各个时间节点比较,差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA法显示分流+慢病毒干扰组caspase-9、caspase-3浓度较分流组、分流+空载病毒中显著增高(P＜0.05),分流组与分流+空载病毒组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:采用RNA干扰技术降低分流型肺动脉高压大鼠PASMCs中survivin的表达能使PASMCs的增殖作用受到抑制,其机制与caspase-9、caspase-3有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庞玉生		79	349	10.0	13.0
2	劳金泉		5	3	1.0	1.0
3	黄静林		2	1	1.0	1.0