原发性干燥综合征B细胞受体库差异表达

• 作者: 宣磊 张卓莉 张奉春 张文 张昊泽 费允云 陈华
• 来源期刊: 中华临床免疫和变态反应杂志
• 关键词: 原发性干燥综合征 B细胞受体库 B细胞克隆 差异表达
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 197-203
• 页数: 7页
• 字数: 4590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969∕j.issn.1673-8705.2020.03.004

摘要

目的 利用高通量测序技术对原发性干燥综合征(primary Sj?jren's syndrone,pSS)患者B细胞受体(BCR)上的互补决定区(CDR)3受体库进行测序分析,评估pSS患者在该受体库的组成、 多样性、 各功能基因亚家族的偏向取用等与健康人群的差异.方法 入组20例初治pSS患者和19例性别年龄匹配的健康对照者,通过磁珠从外周血单个核细胞中分选出CD19+B细胞,提取基因组DNA,进行多重聚合酶链反应和测序,然后对数据进行生物学分析,采用独立样本t检验和Manne Whitney U检验对数据进行统计学处理.结果 pSS患者CDR3序列平均长度为(53.03±1.68)bp,显著低于健康对照者(55.47±1.52)bp(P<0.001).对CDR3多样性的比较分析发现:D50指数在pSS患者为(0.217±0.014),显著低于健康对照(0.229±0.020)(P=0.04),表明pSS患者CDR3克隆多样性较健康对照者明显下降.pSS患者和健康对照者V/J基因优势取用分析显示:pSS患者在V功能性家族性基因中,对IGHV1、IGHV4、IGHV5、IGHV6的取用率显著高于健康对照者,对IGHV3的取用率显著低于健康对照者;pSS患者在J功能性家族性基因中,对IGHJ1、IGHJ2、IGHJ3的取用率显著高于健康对照者(P<0.05).在BCR CDR3受体库基础上筛选出普遍存在于抗SSB抗体阳性pSS患者外周血B细胞BCR H链的优势取用CDR3序列,与健康对照组比较,发现3种与疾病特征性相关的共享克隆型(CARAGMDVW、CARGRYYYYGMDVW、CAKDNKPL-NYDILTGQMNYGMDVW)在pSS患者中存在显著富集现象.结论 pSS患者BCR CDR3序列长度和多样性显著低于健康对照者,以及其功能基因亚家族V/J基因存在非随机优势取用及共享克隆现象,均提示pSS患者某些B细胞存在特异性克隆扩增可能.对BCR CDR3受体库的进一步深入研究,将有助于发现pSS患者疾病相关B细胞克隆,监测疾病状态下B细胞活化状态,寻找潜在的pSS特异性自身抗原.