毛白杨细胞色素C还原酶的基因克隆、表达和亚细胞定位

• 作者: 曾琪琦 盖颖 蒋湘宁
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 毛白杨(Populus tomentosa) CPR P450 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 基因组学及功能基因
• 页码范围: 2423-2430
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.018.002423

摘要

为克隆得到毛白杨CPR基因、成功在体外表达可溶性蛋白并通过构建GFP偶联载体观察其亚细胞定位,本研究通过RT-PCR的方法克隆得到了毛白杨CPR基因,登录号为MK575137.进一步通过生物信息学分析,发现毛白杨CPR与毛果杨CPR同源性最高,均有着典型的细胞色素C还原酶结构域.随后在酵母表达体系中表达该蛋白,验证了该蛋白不能被分泌表达,表明CPR蛋白为膜蛋白.进一步的亚细胞定位实验表明,CPR蛋白定位于内质网.CPR蛋白是P450单加氧化酶催化木质素合成的相关过程中必不可少的辅酶,该研究可为今后体外验证毛白杨P450单加氧化酶在木质素合成的相关过程中的酶活活性提供基础.