一个黑曲霉细胞色素P450基因启动子的结构与表征

• 作者: 寇航 王艳梅 申玉玉 路福平 马梅 高丽影 黎明
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑曲霉 细胞色素P450启动子 启动子元件 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 食品与生物技术
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: Q814.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20200114

摘要

黑曲霉是工业生产上的重要模式菌株,其启动子活性对其生产效率有重要影响;细胞色素P450是调控菌体能量代谢、细胞生长和各种代谢产物合成的关键酶.通过对细胞色素P450基因启动子区域(PP450)的克隆、结构分析和功能鉴定,为P450基因的表达调节研究和P450启动子的应用提供基础.从黑曲霉基因组克隆出细胞色素P450基因(An11g01980)的上游片段PP450,连接到pGEM-T载体进行测序,用启动子分析网站GPMiner和EMBOSS分析PP450片段的启动子功能元件,结果显示:PP450片段的-864～-106 bp处有一段长为759 bp的CpG区域,含有2个TATA盒、6个CAAT盒、2个GC盒和1个可能的AmyR结合位点.构建含PP450启动子的启动子–报告基因表达载体pPZP-PP450并转化黑曲霉,通过荧光强度检测启动子功能,结果表明该启动子是一个组成型启动子,但添加沃氏氧化物后启动子表达强度明显增强,推测该启动子区域可能含有沃氏氧化物相关的反应元件或增强子.