利用Trim-Away技术降低人胰岛淀粉样多肽在大鼠胰岛素瘤细胞中的毒性

• 作者: 孔德麟 杨琳 梁洋 滕春波 聂玉哲 龚葭薇
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: Trim-Away 人胰岛淀粉样多肽 β细胞 胰岛素分泌
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 586-598
• 页数: 13页
• 字数: 7856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.20-061

摘要

人胰岛淀粉样多肽(human islet amyloid polypeptide,hIAPP)又称胰淀素(Amylin),是胰岛 β 细胞中胰岛素的共分泌蛋白,与胰岛素共同包裹在囊泡中被分泌出细胞.正常生理条件下,hIAPP有助于胰岛素分泌并调节机体血糖平衡;但其蛋白错误折叠或过量积累则会对细胞造成毒性,进而影响β细胞功能,导致机体罹患2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM).为了清除细胞内过度积累的hIAPP,且不影响其正常的合成功能,本研究选用一种新的蛋白质降解技术——Trim-Away,该技术可以在短时间内降解目标蛋白质,且不会对靶蛋白的mRNA转录、翻译等功能产生影响.首先在大鼠(Rattus norvegicus)胰岛素瘤细胞(insulinoma cells,INS1)中过表达hIAPP模拟其过度累积的情况,并通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放、CCK8(cell counting kit-8)的活性以及PI-Annexin V流式检测的阳性比例变化,证明hIAPP的过度积累造成 β 细胞的凋亡;通过实时定量PCR及ELISA检测发现胰岛素的合成和分泌都受到了阻碍;最后利用Trim-Away技术在hIAPP过表达的INS1细胞中特异性清除了过度积累的hIAPP蛋白.细胞活性实验证实清除hIAPP蛋白可以减少细胞的死亡,ELISA实验证实INS1细胞恢复了胰岛素的分泌能力.本研究验证了hIAPP过度积累对INS1细胞的毒性作用,并且证明Trim-Away技术在清除胰腺 β细胞中hIAPP毒性具有效果,为利用Trim-Away治疗糖尿病提供了新的策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂玉哲	东北林业大学生命科学学院	19	89	6.0	8.0
2	梁洋	东北林业大学生命科学学院	33	75	6.0	7.0
3	滕春波	东北林业大学生命科学学院	29	95	6.0	9.0
4	杨琳	东北林业大学生命科学学院	9	60	4.0	7.0
5	龚葭薇	东北林业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	孔德麟	东北林业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0