LV-EGFP标记兔角膜基质细胞体外基质层移植的实验观察

• 作者: 孙子雯 张璐 李妍 李梦怡 李楠钰 王爔炯 胡竹林
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 关键词: 角膜基质细胞 慢病毒 增强型绿色荧光蛋白 细胞移植
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 字数: 4425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3980/j.issn.1672-5123.2020.1.07

摘要

目的:探讨兔角膜基质细胞(CSCs)体外移植兔角膜后的存活时间.方法:体外培养原代兔CSCs,并行细胞免疫组化鉴定,利用慢病毒载体(LV)携带标记基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转染兔CSCs,倒置荧光显微镜下观察转染后细胞生长状态及荧光强度,体外动物实验,随机分为2组,实验组行LV-EGFP标记的兔CSCs细胞悬液角膜基质注射,对照组等量生理盐水角膜基质注射,转染后1wk,1 mo取材冰冻切片观察移植的CSCs荧光,石蜡切片行苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态.结果:LV-EGFP转染兔CSCs在倒置荧光显微镜下24h后可见少量荧光,96h和110h荧光较强,转染后的CSCs与正常CSCs细胞形态无明显差异;转染后1wk,1 mo实验组中角膜基质层中可见绿色荧光,对照组中无绿色荧光;石蜡切片1wk实验组见明显上皮细胞增生及角膜轻微水肿,少量炎症细胞浸润,转染后1 mo实验组上皮细胞增生减弱,未见角膜层水肿;对照组1wk,1 mo均未见明显异常.结论:LV-EGFP标记的兔CSCs行体外角膜基质移植,可在角膜中至少存活1 mo,且与邻近组织相容性较好.